本文從以下幾個(gè)角度介紹,。
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5,、2024高考調(diào)研模擬卷(四)
6,、2024年高考模擬檢測(cè)卷卷四
7、2023-2024年度下學(xué)年高三年級(jí)模擬考試四
8,、2024全國(guó)最新高考模擬示范卷四
9,、2024年全國(guó)高考調(diào)研模擬試卷(四)文科綜合答案
10、2024年全國(guó)高考調(diào)研模擬試卷(四)理科數(shù)學(xué)
高考·模擬調(diào)研卷(四)4理科綜合XN試題)
將獲得的突變基因?qū)似胀ù竽c桿菌之前,，先構(gòu)建基因表達(dá)載體,。圖1為所用載體示意圖，表為限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),。圖2為通過PCR定點(diǎn)誘變改造基因的流程圖,。請(qǐng)回答下列問題：限制酶HindⅢPvit2Kpn IHindlllPvit2識(shí)別序列及AAGCTTCAGCTGGGTACCBamH I啟動(dòng)子Kpn I氨芐青霉素EcoR I切割位點(diǎn)TTCGAAGTCGACCCATGG抗性基因Pstl終止子限制酶EcoRPst IBamH I復(fù)制原點(diǎn)識(shí)別序列及GAATTCCTGCAGGGATCCKpn I切割位點(diǎn)CTTAAGGACGTCCCTAGG圖1(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，為使目的基因與載體正確連接,，在擴(kuò)增目的基因時(shí),，應(yīng)在其一對(duì)引物的5'端分別引入兩種不同限制酶的識(shí)別序列。在目的基因和載體連接時(shí),，可選用(填“E.coli DNA連接酶”或“T4DNA連接酶”),。(2)構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要使用大腸桿菌蛋白基因的啟動(dòng)子tac,原因是將受體菌置于含有的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選培養(yǎng)，以獲得能表達(dá)基因產(chǎn)物的細(xì)菌,。(3)利用大引物PCR進(jìn)行定點(diǎn)誘變需要進(jìn)常規(guī)下游引物行兩輪PCR,PCR過程中需要擬突變位點(diǎn)3←553酶,。在第一次PCR中，至少需要突變上游引物5一入→3'個(gè)循環(huán)才能獲得相應(yīng)的大引物模板,。利用所獲得的大引物模第一次PCR板和其他引物進(jìn)行第二次PCR過程,，大引人3要獲得帶有誘變點(diǎn)的改良基因，引物3'3應(yīng)選用大引物兩條鏈中的常規(guī)上游引物5'5'→3'(填“①”或“②”),。與X射線誘變相5Λ3→3'①比,，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是5'②第二次PCR533'J圖2理科綜合試題第24頁（共24頁）
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