1試題(生物))
①檢測結(jié)果表明,，B基因可以(填促進(jìn)抑制”)BI基因的轉(zhuǎn)錄,。判斷依據(jù)是②F2、F3個(gè)體中mRNA的轉(zhuǎn)錄量與BB'相近,，且均遠(yuǎn)低于親本BBI,說明③科學(xué)家把上述現(xiàn)象稱作副突變,。副突變是基因間的相互作用，這種作用發(fā)生在間,，本實(shí)驗(yàn)中誘副突變基因和易副突變基因分別是(3)已知RNAi能降解相應(yīng)的mRNA,請據(jù)此提出一種假說解釋副突變的作用機(jī)理(4)有人認(rèn)為副突變現(xiàn)象在雜交育種中具有縮短育種年限的潛在應(yīng)用,，該說法是否有道理，并說出理由25.(10分)解整合素-金屬蛋白酶33（由ADAM33基因編碼）是參與氣道重塑的生長因子,，可誘導(dǎo)哮喘發(fā)作。為研究GATA結(jié)合蛋白3（由GATA3基因編碼）與哮喘的關(guān)系,，科研人員構(gòu)建了ADAM33和GATA3的pGl3-Basic表達(dá)載體,，并導(dǎo)入HEK293細(xì)胞。下圖為ADAM33表達(dá)載體的構(gòu)建過程,。a鏈HO馬334P?b鏈⊙調(diào)控區(qū)編碼區(qū)LOHADAM33Kpn IBglII終止子1uc+:熒光素酶基因I口uc+-MCSAmp':氨卞青霉素抗性基因pG13-BasicAmp復(fù)制原點(diǎn)上(1)以人的基因組DNA為模板,，設(shè)計(jì)P1、P2,、P3,、P4、P5五個(gè)上游引物和一個(gè)下游引物F,。為使基因能夠正常表達(dá),，上游引物設(shè)計(jì)在ADAM33的調(diào)控區(qū)，原因是pGl3-Basic的MCS上有多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn),，其意義是(2)已知F引物上構(gòu)建了BgI序列,，則應(yīng)在P1~P5的端構(gòu)建Kpnl序列。在P1~P5上,，限制酶序列3端以外的其它堿基序列應(yīng)與(填“a鏈b鏈)上的相應(yīng)堿基序列相同,。分別將含有P1~P5不同長度的DNA導(dǎo)入pG13-Basic,構(gòu)建P1~P5重組質(zhì)粒。40r(3)HEK293是細(xì)胞系細(xì)胞,，可在體外培養(yǎng),。將g30P1~P5重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)盜后裂解細(xì)胞,，離心取上清液,，隨后加入熒光素酶底物檢測熒光酶活性,，結(jié)果如圖。10對照組的實(shí)驗(yàn)處理是,。為獲得包含強(qiáng)啟動對照組P1組P2組P3組P4組P5組子的ADAM33,上游引物應(yīng)選用HEK293細(xì)胞(4)用相似方法構(gòu)建GATA3重組質(zhì)粒,。將P1~P5組中含有強(qiáng)啟動子一組細(xì)胞分為甲、乙兩組,，甲組不做處理,，乙組轉(zhuǎn)染GATA3重組質(zhì)粒，檢測ADAM33的轉(zhuǎn)錄水平,，結(jié)果如圖,。實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步表明如泰”甲組乙組高三生物學(xué)第8頁（共8頁）
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