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3.(10分,,除標(biāo)注外,,每空1分)(1)堿基互補(bǔ)配對原則dCTP耐高溫的DNA聚合酶(Tag酶)14(2)I和Ⅱ用限制酶I和Ⅱ切割不僅能夠使目的基因插人到T-DNA片段中,,還可以防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化或反向連接現(xiàn)象的發(fā)生(2分)(3)四環(huán)素或卡那霉素基因槍法、花粉管通道法病毒接種名求其的通白蛋【解析】(1)PCR過程遵循堿基互補(bǔ)配對原則,,需要加人的原料是dATP,、dTTP、dCTP和dGTP,酶是耐高溫的DNA聚合酶(Tag酶),;PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因時(shí),,緩沖液中需要加入的引物個(gè)數(shù)計(jì)算公式為0一2,因此一個(gè)目的基因經(jīng)過3次循環(huán)需要消耗引物23+1-2=14個(gè),。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),,需要用限制酶I和Ⅱ分別對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,這樣不僅能夠使目的基因插人到T-DNA片段中,,還可以防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化或反向連接現(xiàn)象的發(fā)生,。話m加((3)由圖可知,標(biāo)記基因是四環(huán)素抗性基因和卡那霉素抗性基因,,因此篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含四環(huán)素或卡那霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行,;植物基因工程中將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,、基因槍法、花粉管通道法,;要確認(rèn)抗病毒番茄是否培育成功,,從個(gè)體水平進(jìn)行檢測,要對培育出的番茄做病毒接種實(shí)驗(yàn),。由縣AQ賈避盤A陽明

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1.(11分,,除標(biāo)注外,每空1分)(1)胰島B反(逆)轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和內(nèi)含子均不含有(2分)民8空辯,,桃書清照,,代0),(2)PCR DNA雙鏈復(fù)制要有一段已知胰島素基因的核苷酸序列,,以便根據(jù)這一序列合成引物(3分)(3)Ca+使大腸桿菌處于感受態(tài):不良自曾1()【解析】(1)胰島B細(xì)胞中胰島素基因能夠表達(dá),,在該細(xì)胞中可以獲得胰島素基因的mRNA,利用mRNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,cDNA中不含有啟動(dòng)子和內(nèi)含子。輝兩用()【補(bǔ)隨(2)通過PCR對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增,,其原理是DNA雙鏈復(fù)制,,前提是要有一段已知胰島素基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物,。(3)將胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,,需要先用Ca2+處理大腸桿菌,使大腸桿菌處于感受態(tài),。站的因基的目國

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