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25.(1)PCR(2分)2(1分)目的基因無復制原點;無標記基因,不易鑒定受體細胞是否導入目的基因;目的基因無法在受體細胞中穩(wěn)定存在(2分)(2)DNA連接(1分)連接后的序列無BglⅡ或BamHI可識別的特定堿基序列(或DNA分子序列發(fā)生了改變,重組分子不能被BglⅡ或BamH I識別和切割)(3分)(3)植物組織培養(yǎng)(1分)在高鹽堿脅迫下觀察楊樹植株的生長狀況(2分)【解析】本題主要考查基因工程,考查學生的理解能力。(1)使用P℃R技術(shù)擴增目的基因,擴增目的基因時需要2種引物與模板鏈結(jié)合。由于基因TSR1無標記基因,無法鑒定受體細胞是否導入目的基因,且該基因無法在受體細胞中穩(wěn)定存在,因此基因TcSR1不直接導入受體細胞。(2)用限制酶BgⅡ切割目的基因和用限制酶BamH I切割質(zhì)粒載體V3后,再用DNA連接酶處理,形成基因表達載體,該表達載體無BglⅡ或BamH I可識別的特定堿基序列,因此不能被BglⅡ或BamH I識別并切割。(3)為進一步研究轉(zhuǎn)基因楊樹的耐鹽堿機制可以通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得大量轉(zhuǎn)基因楊樹植株,并在高鹽堿脅迫下觀察植株的生長狀況。

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